In ungefähr 10 - 15 % der Fälle treten bei der Konstrukt-Integration im Genom transgener Mäuse Insertionsmutationen auf, die durch zufälligen "Gen-Knockout" zum Verlust einer Genfunktion und zu einem Phänotyp führen können, der dem einer Krankheit beim Menschen ähnelt. Die in unserem Labor generierte Insertionsmutante (TC-Maus) zeigt in rezessiver Form eine auffällige neurologische Erkrankung mit Verhaltensauffälligkeiten wie verminderter motorischer Aktivität (Hypokinesie) und einer starken Neigung zur Hyperreflexie. Zusätzlich zeigen morphologische Untersuchungen an Hippocampus-Schnitten korrelierende massive Veränderungen der Hippocampus - Morphologie, wie man sie auch in epileptischen Mausmodellen findet. Der Insertionsort im Mausgenom wurde über FISH-Hybridisierung lokalisiert und wird derzeit in unserem Labor über genomische Klonierung ("Genome Walking" und positionelle Klonierung) charakterisiert.

Durch unsere vorläufigen Ergebnisse an Prostatakarzinomzellen der Ratte (PA-III) konnte gezeigt werden, daß die Inhibierung der IGF-I Rezeptor Expression in diesen Tumorzellen zu einer Abnahme der Expression von Plasminogenaktivatoren und zu einer verminderten Invasivität dieser Zellen führt. Ziel dieses Projektes ist die Inhibierung beider Systeme durch in vitro Kotransfektionsexperimente mittels antisense RNA Konstrukten und die Isolierung und Charakterisierung von Genen, die die Tumorzellinvasion regulieren. Als Ausgangsmaterial dient die invasive Tumorzellinie PA-III der Ratte. Mit Hilfe des Matrigel-Invasion-Assay konnte gezeigt werden, daß das Invasivitätspotentials der mit antisense-RNA modifizierten Prostatakarzinomzellen im Vergleich zu den invasiven, kontrolltransfizierten Zellen abnimmt. Die selektierten Tumorzellklone mit nichtinvasivem und invasivem Phänotyp sollen auf differentiell exprimierte Gene hin untersucht werden. Mit Hilfe des Atlas-cDNA-Expression-Arrays und des Gene-Detection-Arrays sollen bekannte und unbekannte Gene identifiziert und charakterisiert werden, die ein differentielles Expressionsmuster in nichtinvasiven/invasiven Prostakarzinomzellen zeigen. Ein weiterer Teil dieses Projektes wird sich mit der funktionellen Charakterisierung der differentiell exprimierten Gene durch in vitro Transfektionsexperimente beschäftigen. Durch Überexpression bzw. Inhibierung der Expression dieser Gene in den nichtinvasiven/invasiven Tumorzellen soll deren Einfluß auf die Invasivität in vitro überprüft werden. Die aus diesem in vitro Ansatz selektionierten Prostatakarzinomzellen sollen dann in vivo auf ihre Invasivität hin untersucht werden.